پایان نامه بيماري اسكلروتينيايي بوته خيار گلخانه ای
ارسال کننده : جناب آقای مهدی جلالی
سطح فعالیت : مدیر ارشد
ایمیل : njiran42[@]gmail.com
تاریخ ارسال : ۲ خرداد ۱۳۹۵
دفعات بازدید : 1222
زبان نوشتاری : فارسی
تعداد صفحه : 90
فرمت فایل : word
حجم فایل : 2.320mb
قیمت فایل : 45,000 تومان
خرید فایل
امتیاز مثبت : 0
امتیاز منفی : 0


بیماری اسکلروتینیایی یکی از مهمترین بیماریهای گیاه خیار میباشد که خسارت قابل توجهی به این محصول وارد مینماید. عامل این بیماریقارچSclerotiniasclerotiorum میباشد که دامنه میزبانی وسیع داشته و دستیابی به ارقام مقاوم خیار تاکنون نتیجه رضایت بخشی نداشته است. اگرچه کنترل شیمیایی این بیماری نسبتا با موفقیت همراه بوده است اما با توجه به مشکلات بهداشتی و زیست محیطی، کنترل بیولوژیکی آن توسط ریزوباکتریهای آنتاگونیست به ویژه گونههای باسیلوس، از اهمیت ویژه ای برخوردار است. در این راستا 182 جدایه باکتریایی از ریزوسفر بوتههای خیار منطقه ورامین جداسازی شد و پس از غربالگری اولیه بر اساس قدرت بازدارندگی علیه S.sclerotiorum،جهت شناسایی و آزمایشهای گلخانهای مورد استفاده قرار گرفتند. حدود 05/45 درصد جدایهها دارای خاصیت آنتاگونیستی بودند. جدایههای امید بخش باBacillus amyloliquefaciensو B. subtilis مطابقت داشتند.در بررسیهای آزمایشگاهی تقریبا تمامی جدایهها با تولید ترکیبات خارج سلولی توانستند از رشد میسلیوم جدایهی S.sclerotiorumممانعت کنند، ولی توانایی جدایهها در ترکیبات فرار ناچیز بود. تمامی جدایهها (AE, FE1, FE2, LE, ME,PE, SH) در آزمون تولید سیانید هیدروژن واکنش منفی نشان دادند. تمامی جدایهها پروتئاز، فسفاتاز، اکسین تولید کردند. در بررسیهای گلخانهایی، از آزمون تیمار بذر و تیمارخاک با باکتریهای آنتاگونیست استفاده شد. در آزمون تیمار بذر جدایههای PE ( B. amyloliquefaciens ) و SH( B. subtilis.) و در آزمون تیمار خاک جدایههای PE (B. amyloliquefaciens )و AE( B. subtilis)بیشترینتاثیر را در کاهش درصد تلفات داشتند. هم چنین تمامی جدایهها باعث تحریک رشد گیاه و افزایش ارتفاع، وزن تر و خشک اندامهای هوایی و ریشه در گیاهچههای خیار شدند. کاربرد باکتری به روش آغشته سازی خاک در مقایسه با روش آغشته سازی بذر در کنترل بیماری موثرتر بود. بر اساس نتایج باکتریهای باسیلوس در کنترل بیولوژیکی بیماری اسکلروتینیایی خیار موثر واقع شدند.
چکیده
1-1-مقدمه
2-1- تاریخچه و اهمیت کنترل بیولوژیک
2-2- مشخصات قارچ شناسی Sclerotinia sclerotiorum
2-3- دامنه میزبانی و پراکنش:
2-4- علایم بیماری:
2-5- چرخه بیماری:
2-6-کنترل بیماری
2-7- کنترل بیولوژیک بیماری پوسیدگی اسکلروتینیایی گیاهان با آنتاگونیستها:
3-1-جداسازيقارچ عاملبیماري
3-1-1- نمونه برداری
3-1-2-جداسازی S. sclerotiorum
3-2- آزمون اثبات بیماریزایی روی گیاهچه های خیار
3-2-1- تهیهمایه تلقیح قارچ بیمارگر
3-2-2- مايهزني
3-2-2-1- استفادهازبذورگندمدارایقارچS.sclerotiorum
3-3- شناسایی عامل بیماری
3-5-تهیه جدایه های آنتاگونیست
3-4- نگه داری قارچ عامل بیماری
3-5-1- جداسازی باکتری از خاک
3-5-2- جداسازی باکتری از ریشه
3-6- نگه داری باکتری ها:
3-7- انتخاب باکتریهای آنتاگونیست در شرایط آزمایشگاه:
3-8- شناسایی باکتری های آنتاگونیست
3-8-2- تعیین توالی قطعه ژنی 16S ribosomal RNAاز ژنوم جدایههای آنتاگونیست
3-8-2-1- مراحل استخراج DNA
3-8-2-1-1- آماده سازی نمونههای مورد آزمایش
3-8-2-1-2- تخریب (لایز) سلولهای باکتری
3-8-2-1-4- تعیین توالی 16S rRNA
3-8-2-1-5-بررسی فیلوژنتیکی 16S rRNA و ترسیم درخت فیلوژنتیکی
3-8-2-1-4-1-شناسایی مولکولی جدایههای آنتاگونیست در پایگاه اطلاعات NCBI
3-8-2-1-4-2- ترسیم درخت فیلوژنتیکی
3-9- بررسی مکانیسم تاثیر جدایه های آنتاگونیستی در شرایط آزمایشگاه
3-9-1- آزمون کشت متقابل
3-9-2-آزمون تولید ترکیبات باز دارندهی خارج سلولی قابل نفوذ در آگار:
3-9-3-بررسی تولید ترکیبات فرار ضد قارچی توسط آنتاگونیست ها:
3-9-4- بررسیتولیدپروتئاز
3-9-5-بررسیتولیدسیانیدهیدروژن
3-9-6- آزمون فسفاتاز
3-9-7- بررسی تولید اکسین
3-10-بررسی توانایی جدایههای باکتری در کنترل بیماری در شرایط گلخانه
3-10-1- تهیه زادمایه جدایههای باکتری آنتاگونیست
3-10-2-آغشته سازی بذر و خاک به باکتریهای آنتاگونیست جهت آزمون تیمار بذر[1] و تیمار خاک[2]
3-11-تجزیه وتحلیل آماری دادهها
4-1- علائم بیماری و جداسازی عامل بیماری
4-2- آزمون اثبات بیماریزایی روی گیاهچههای خیار
4-3- جداسازی و غربالگری باکتریهای آنتاگونیست
4-4- شناسایی باکتریهای آنتاگونیست
4-4-1- تعیین توالی 16S rRNA
4-4-3- ذخیره توالی در بانک ژن
4-5-اثر بازدارندگی جدایههای باکتری در شرایط آزمایشگاهی
4-5-1-آزمون کشت متقابل
4-5-4- بررسی تولید پروتئاز
4-5-5- بررسی تولید سیانید هیدروژن
4-5-6-آزمون فسفاتاز
4-5-7-بررسی تولید اکسین
4-5-8- تاثیر باکتریهای آنتاگونیست در شرایط گلخانه
4-5-8-1- تاثیر جدایههای آنتاگونیست روی درصد تلفات گیاهچههای خیار
4-5-8-2-تاثیر جدایههای آنتاگونیست روی فاکتورهای رشدی گیاهچههای خیار
4-5-8-1-1- تاثیر جدایههای آنتاگونیست روی درصد تلفات گیاهچههای خیار در تیمار بذر و تیمار خاک
4-5-8-2- بررسی اثر باکتریهای آنتاگونیست روی فاکتورهای رشدی گیاهچههای خیار
4-5-8-2-1- تاثیر باکتریهای آنتاگونیست روی فاکتورهای رشدی گیاهچه های خیار در تیمار بذر
4-5-8-2-2- تاثیر باکتریهای آنتاگونیست روی فاکتورهای رشدی گیاهچه های خیار در تیمار خاک
بحث :
پیشنهادات:
منابع
جالیزکاری نقش مهمی در اقتصاد کشاورزی ایران دارد. 332 هزار هکتار برابر با 6/2 درصد از برداشت اراضی محصولات کشاورزی به انواع محصولات جالیزی اختصاص دارد. در این بین خیار با 5/23 درصد سطح زیرکشت از اهمیت ویژهایی برخوردار است. خياردربينگروه محصولات جالیزی، مقامسومرابعدازهندوانه و خربزهداراميباشد (دفتر آمار و فناوری اطلاعات وزارت جهاد کشاورزی،1390).طبق گزارش FAO, 2006)(، سالانه 13,142,000 تن انواع خیار در جهان تولید میشود که 7,095,000 تن مربوط به آسیا 3,020,000 تن مربوط به اروپا و 1,021,000 تن مربوط به آمریکای شمالی است. سطح زیر کشت خیار در جهان بیش از860,000 هکتار است (ایرانبخش، 1386). خيار با نام علمیCucumis sativus)) ازگياهانعالي یکساله جالیزگلدار میباشد،ازردهدولپهايها و تكپايه ازتيرهكدوئيان (Cucurbitaceae) که دارای 118 جنس و825 گونه است(Jeffrey, 1990). از لحاظ باغباني خيار جزء آن دسته از سبزي هايي است كه ميوه آن مصرف مي شود و از لحاظ شرايط محيطي جزء گياهان حساس به سرما مي باشد .(Whitaker and Davis, 1982)
قرار دادن خيار خام روي پوست، حرارت و التهاب را کاهش مي دهد. خاصيت خنک کننده و تميزکنندهی آن براي پوست مفيد است. آب خيار تازه، سوزش سردل، اسيد معده، زخم معده و ورم معده را تسکين ميدهد و برای بیماران دیابتی مفید است. قرار دادن برش خيار روي چشم نه تنها تسکين آور است بلکه ورم را نيز کاهش ميدهد. مصرف روزانهی آب خيار، در کنترل بيماري اگزما، آرتروز و نقرس نقش دارد و براي افرادي که از بيماري ريه، معده و سينه رنج ميبرند، مفيد است. پتاسيم موجود در این گیاه براي بيماران داراي فشارخون بالا مفيد است. این گیاه حاوي آنزيمي به نام ارپسين (Erepsin) است که در هضم پروتئين کمک ميکند. خيار براي مقابله با بيماري هاي دندان و لثه نيز موثر است. اين ميوه خاصيت درماني براي بيماري هاي کليوي، مثانه، کبد و لوزالمعده دارد. ماده معدني موجود در آن مانع ايجاد شکاف در ناخن هاي دست و پا مي شود. در خیار ترکیبات شیمیایی شامل پروتئین، چربی، نشاسته، فسفر، آهن، کلسیم، پتاسیم، سدیم و ویتامین های آ- ب- ث- و ويتامين K (مانع رشد سلول هاي سرطاني و تومور ميشود) وجود دارد. پوست خيار منبع خوب سيليکا (Silica) است که براي حفظ سلامتي بافت پيوندي موثر است. خوردن خیار با پوست، مخصوصاً اگر تر و تازه باشد، برای معده بسیار مفید فایده است.......